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玉米原生质体提取方法

2020-04-10 22:24:55 admin 19

一,酶解液的组成:

1,纤维素酶0.7%果胶酶0.5%]山梨醇14%氯化钙5mmolL-1,PH5.8.

二,漂洗液的组成:

山梨醇14%,硝酸钾1mmolL-1磷酸二氢钾2mmolL-1,氯化钙0.5mmolL-1,硫酸铜0.01mmolL-1.

三,材料预处理

取黄花叶片,去中脉放入25%蔗糖溶液中处理15-20分钟,使其发生壁分离,然后用于酶解。

四,进行两次酶解结束后,将叶片取出放于漂洗当中漂洗抖动使原生质释放出来,然后将漂洗液再1500rpm离心5分钟,沉淀即为原生质体.实验证明在离心力为2500rpm,时间5分钟时,原生质体得到率最高。